广东佛山市伦教镇一加州鲈鱼养殖池塘,面积7亩,水深1.7米,5台增氧机(见图1),2014年4月5日,从旁边塘分塘,分8万尾大规格的加州鲈鱼,小规格的留在原塘养殖。
2014年5月21日左右开始每天有几十条鱼游水、死亡,之后逐渐增多,到5月31日,每天死亡量达到5000尾。其中内服抗菌药物5天和外用中药制剂,但是越用药死亡越多,调水后死亡略有下降。6月2日,死鱼6000尾,停料并停止用药。6月3日-6月6日,每天死亡6000尾。截止6月6日共计死鱼5万多尾。发病鱼规格8-10cm。
6月7日,下午3:00到现场测定水温34℃,用简易测试盒测水,pH值8.6,氨氮0.2mg/L,亚硝酸盐0.05mg/L。池塘下风口漂浮着大量死鱼(见图2),塘中有少量鱼游水,基本见不到打转的鱼。从塘中取出7尾游水鱼,病鱼烂鳍、烂身、烂尾,其中一尾鱼烂眼,一尾黑身(见图3)。解剖病鱼鳃有少量出血点,肝脏严重肿大、充血(见图4),脾脏肿大,胃肠空虚,肾脏肿大(见图5)。分别从7尾鱼的肝脏、肾脏中接种进行细菌分离培养,并取肝脏、脾脏、肾脏分别用95%酒精及波恩氏液固定做病毒检测及组织病理切片观察。另据养殖户介绍旁边的母塘养殖的小规格加州鲈鱼,因为相同的症状已经全部死亡。
结果:经28℃培养24小时,7尾病鱼均无细菌感染(见图6),病毒检测7尾鱼弹状病毒均呈阳性(见图7)、蛙虹彩病毒均呈阴性(见图8),组织病理切片结果显示:肝脏严重淤血,空泡变性,肝细胞界限不明,细胞坏死(见图9),脾脏轻微淤血,严重坏死(见图10),肾脏淤血,肾小管萎缩,肾间组织细胞多坏死(见图11)。
分析:1、珠三角地区养殖加州鲈苗种经常发生一种急性死亡的疾病,死亡量大,用抗菌药物无效,从流行病学特点和临床症状上判断很可能是病毒引起的。本病例通过PCR方法对发病鱼做了弹状病毒检测,从加州鲈鱼苗样品中扩增出与预扩增片段(372bp)大小相同的目的条带,目的条带通过正反两次测序,其序列与GenBank中鳜鱼弹状病毒(SCRV)的基因序列同源性为96.3%,证实加州鲈鱼感染了弹状病毒。在珠三角大量养殖的鳜鱼、杂交鳢发生的弹状病毒病已经得到证实,加州鲈的这种急性死亡初步诊断也是由弹状病毒引起的。
2、烂身病是加州鲈的常见病和多发病,诺卡氏菌、气单胞菌都能引起,有研究者报道蛙虹彩病毒也能引起,本病例所取的7尾病鱼都有烂身症状,从检测结果来看,无细菌感染和蛙虹彩病毒感染,因此本病例的“烂身”很可能与弹状病毒感染有关。
作者简介:雷燕,就职于广州利洋水产科技有限公司研究所,主要从事水产动物常见病毒病、细菌病的诊断与研究工作。